顯微鏡,顯微鏡價(jià)格,顯微鏡的價(jià)格

　　一革蘭染色的試驗(yàn)步驟

　　1.涂片：滴一小滴無菌水于載玻片中心，用接種環(huán)取平板或斜面培養(yǎng)物少許，與載玻片上的水滴混雜均勻，涂成一薄層。

　　2.干燥：涂片后在室溫下自然干燥，也可在酒精燈上略加溫，使之敏捷干燥，但勿靠近火焰。

　　3. 固定：常用高溫進(jìn)行固定。即手持載玻片一端，標(biāo)本面朝上，在燈的火焰外側(cè)快速往返移動3~4次，共約3~4秒。請求玻片溫度不超過60℃，以玻片背面觸及手背皮膚不覺過燙為宜，放置待冷后染色。

　　4. 染色：（1）初染：結(jié)晶紫染液，奧林巴斯生物顯微鏡，1min ，水洗。（2）媒染：盧戈碘液，1min，水洗。 （3）脫色：95%乙醇，30s，轉(zhuǎn)動玻片，水洗。（4）復(fù)染：稀釋復(fù)紅液，30s，水洗。 5.鏡檢：菌體呈紫色的為“革蘭陽性菌”（G+菌）；菌體呈紅色，為“革蘭陰性菌”（G- 菌）。二.尿液標(biāo)本的培養(yǎng)檢討

　　一、培養(yǎng)檢查

　　1．一般細(xì)菌培養(yǎng) 用無菌接種環(huán)取尿液接種于血瓊脂平板和麥康凱Macc(或中國藍(lán)EMB)平板上，35℃培養(yǎng)18～24h，觀察結(jié)果，依據(jù)菌落形態(tài)特點(diǎn)及涂片鏡檢結(jié)果，選擇相應(yīng)方式作進(jìn)一步鑒定，如培養(yǎng)48h無菌生長，則可報(bào)告“無細(xì)菌生長”。

　　2．特別細(xì)菌培養(yǎng)

　　(1)淋病奈瑟菌培養(yǎng)：尿標(biāo)本收到后立即接種于預(yù)溫35℃的巧克力瓊脂平板，置35℃5％～l0％C02環(huán)境中培養(yǎng)。

　　(2)結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)：將尿液接種于血瓊脂平板上，35℃培養(yǎng)18～24h后無細(xì)菌生長，可將尿液3 000r/min離心30min后取沉淀物0.1ml接種在羅氏培養(yǎng)基上。

　　(3)假絲酵母菌培養(yǎng)：將尿液接種沙保弱瓊脂平板上，25～30℃培養(yǎng)。

　　(4)厭氧菌培養(yǎng)：用穿刺尿進(jìn)行培養(yǎng)，接種厭氧血瓊脂平板，厭氧環(huán)境中培養(yǎng)。

　　二、定量培養(yǎng)

　　1．平板接種法 用定量加樣器取5ul尿液滴注在瓊脂平板上，用接種環(huán)涂抹均勻，35℃培養(yǎng)24h，生長的菌落數(shù)乘200，即為每毫升尿中細(xì)菌數(shù)。

　　2．定量接種環(huán)法 用定量接種環(huán)蘸取尿液標(biāo)本(10p1)在血瓊脂平板上作均勻劃線接種，置35℃培養(yǎng)24h，計(jì)數(shù)生長的菌落數(shù)乘以100，即為每毫升尿

　　三.平板劃線分別法

　　　　在被檢標(biāo)本中，?；煜卸喾N細(xì)菌，平板劃線分離法可使這多種細(xì)菌在培養(yǎng)基表面疏散生長，各自形成菌落，以便依據(jù)菌落的形態(tài)及特點(diǎn)，挑選單個(gè)菌落進(jìn)行純培養(yǎng)。常用的平板劃線分離法有以下兩種：

　　　　1.持續(xù)劃線分離法：此法重要用于雜菌未幾的標(biāo)本。用接種環(huán)取標(biāo)本少許，于平板1/5處密集涂布，然后往返作曲線持續(xù)劃線接種，

　　線與線間有必定間隔，劃滿平板為止。

　　　　2.分區(qū)劃線分別法：本法實(shí)用于雜菌量較多的標(biāo)本。先將標(biāo)本均勻涂布于平板表面邊沿一小區(qū)（第一區(qū)）內(nèi)，約占平板1/5面積，再在二、三、……區(qū)依次持續(xù)劃線。每劃完一個(gè)區(qū)，均將接種環(huán)滅菌一次。每一區(qū)的劃線均接觸上一區(qū)的接種線1、2次，使菌量逐漸減少，

　　以獲得單個(gè)菌落。

　　3、劃線完畢，蓋上平皿蓋，底面向上，用標(biāo)簽或臘筆注明菌名檢驗(yàn)號碼，接種者信息等，置37℃孵育造就24小時(shí)后察看成果。

　　四.細(xì)菌檢驗(yàn)標(biāo)本處置操作規(guī)程

　　1．目標(biāo)

　　規(guī)范細(xì)菌檢驗(yàn)標(biāo)本處置操作規(guī)程。

　　2．實(shí)用范疇

　　細(xì)菌檢驗(yàn)標(biāo)本。

　　3．職責(zé)

　　細(xì)菌檢驗(yàn)職員嚴(yán)厲履行本程序。

　　4．程序

　?。?）血液標(biāo)本

　　吸收標(biāo)本后，立即抄寫檢驗(yàn)記錄單，住院病人需先收取細(xì)菌培養(yǎng)鑒定費(fèi)用。門診病人在檢驗(yàn)記錄單上記錄住址、聯(lián)系電話等信息。將血細(xì)菌培養(yǎng)瓶置于全主動培養(yǎng)儀中培養(yǎng)。

　　（2）痰標(biāo)本

　　接受時(shí)檢查送檢標(biāo)實(shí)質(zhì)量，隨后繕寫檢驗(yàn)記錄單，住院病人需先收取細(xì)菌培養(yǎng)鑒定用度。門診病人在檢驗(yàn)記錄單上記錄住址、接洽電話等信息。

　　用接種環(huán)挑取膿性痰液后在第一區(qū)重復(fù)涂抹，盡量將包裹在痰中的病原菌接種在平板上，如無法用接種環(huán)挑取痰液時(shí)，用無菌棉簽挑取標(biāo)本分辨涂布于血瓊脂平板、巧克力瓊脂平板，麥康凱平板的第一區(qū)，然后用接種環(huán)劃第二、第三區(qū)。

　　同時(shí)做痰涂片鏡檢，將成果記載在檢驗(yàn)記載單上。

　　（3）咽拭子標(biāo)本：吸收時(shí)檢查送檢標(biāo)本質(zhì)量，隨后抄寫檢驗(yàn)記錄單，住院病人需先收取細(xì)菌培養(yǎng)鑒定費(fèi)用。門診病人在檢驗(yàn)記錄單上記錄住址、聯(lián)系電話等信息。將標(biāo)本涂布于血瓊脂平板、巧克力瓊脂平板，麥康凱平板的第一區(qū)，然后用接種環(huán)劃第二、第三區(qū)。

　?。?） 腦脊液、關(guān)節(jié)液、心包穿刺液、胸腹水等穿刺液：床邊抽取體液標(biāo)本（成人瓶：5～8ml；小兒瓶：1～3ml）注進(jìn)細(xì)菌培養(yǎng)瓶后送試驗(yàn)室。吸收標(biāo)本后，立即抄寫檢驗(yàn)記錄單，住院病人需先收取細(xì)菌培養(yǎng)鑒定費(fèi)用。門診病人在檢驗(yàn)記錄單上記錄住址、聯(lián)系電話等信息。將血細(xì)菌培養(yǎng)瓶置于全主動培養(yǎng)儀中培養(yǎng)。

　?。?） 糞便或肛拭標(biāo)本：接受時(shí)檢討送檢標(biāo)實(shí)質(zhì)量，隨后繕寫檢驗(yàn)記錄單，住院病人需先收取細(xì)菌培養(yǎng)鑒定用度。門診病人在檢驗(yàn)記載單上記載住址、接洽電話等信息。立即取糞便膿血部位標(biāo)本依據(jù)檢驗(yàn)申請請求選擇平板接種。一般細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)接種血瓊脂平板、麥康凱平板和SS平板。

　　（6 ）尿標(biāo)本：接受時(shí)檢討送檢標(biāo)實(shí)質(zhì)量，隨后

　　五.顯微鏡的應(yīng)用與維護(hù)

　　1．將顯微鏡置于安穩(wěn)的試驗(yàn)臺上，鏡座距實(shí)驗(yàn)臺邊緣約為4cm，坐正。

　　2．調(diào)節(jié)光源：將低倍物鏡轉(zhuǎn)到工作地位，把光圈完整打開，聚光器升至與載物臺相距約1mm左右。轉(zhuǎn)動反光鏡采集光源，光線較強(qiáng)的自然光源宜用平面鏡，光線較弱的自然光源或人工光源宜用凹面鏡，對光至視野內(nèi)均勻明亮為止。視察染色裝片時(shí)，光線宜強(qiáng)；觀察末染色裝片時(shí)，光線不宜太強(qiáng)。

　　3. 低倍鏡觀察染色裝片

　　首先降落鏡臺，將酵母菌染色裝片置于載物臺上，用標(biāo)本夾夾住，將觀察地位移至低倍鏡正下方，鏡臺升至距裝片0.5cm處，恰當(dāng)縮小光圈然后兩眼從目鏡觀察，轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡臺降低至發(fā)明物像時(shí)，改用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)到物像明白為止。移動裝片，把適合的觀察部位移至視野中心。

　　4. 高倍鏡察看染色裝片

　　眼睛分開目鏡從側(cè)面觀察，旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器，將高倍鏡轉(zhuǎn)至正下方，注意避免鏡頭與玻片相撞。再由目鏡觀察，細(xì)心調(diào)節(jié)光圈，使光線的明亮度合適。用細(xì)調(diào)節(jié)器校訂焦距使物鏡清楚為止。將Zui合適觀察部位移至視野中心。不要移動裝片地位，籌備用油鏡觀察。

　　5. 油鏡觀察染色裝片

　　提起鏡筒約2cm，將油鏡轉(zhuǎn)至正下方。在玻片標(biāo)本的鏡檢部位(鏡頭的正下方)滴一滴香柏油；從側(cè)面凝視，警惕慢慢降下鏡筒，使油鏡浸在油中至油圈不擴(kuò)展為止，鏡頭幾乎與裝片接觸，但不可壓及裝片，以免壓碎玻片，破壞鏡頭；

　　將光線調(diào)亮，從目鏡觀察，用粗調(diào)節(jié)器將鏡臺漸漸降落(切忌反方向旋轉(zhuǎn))，當(dāng)視野中有物像呈現(xiàn)時(shí)，再用細(xì)調(diào)節(jié)器校訂焦距。如末找到物像，必需再從側(cè)面視察，將油鏡降下，反復(fù)操作直至物像看清為止。細(xì)心視察并繪圖；再次觀察提起鏡筒，換上細(xì)菌三型染色裝片，依次用低倍鏡、高倍鏡和油鏡觀察，繪圖。反復(fù)觀察時(shí)可比第一次少加香柏油。

　　6. 鏡檢完畢后的工作

　　降落鏡臺，取出裝片；干凈油鏡，油鏡應(yīng)用完畢后，須用擦鏡紙擦往鏡頭上的香柏油，再用擦鏡紙沾少許擦鏡液擦掉殘留的香柏油，Zui后再用清潔的擦鏡紙擦干殘留的擦鏡液；擦凈顯微鏡，將各部分還原。將接物鏡呈“八”字形，不可使其正對聚光器，同時(shí)降下聚光器，轉(zhuǎn)動反光鏡使其鏡面垂直于鏡座。Zui后套上鏡罩，對號放進(jìn)鏡箱中，置陰涼干燥處寄存。

　　繕寫檢驗(yàn)記錄單，住院病人需先收取細(xì)菌培養(yǎng)

　　六.斜面接種法

　　此法重要用于鑒定或保留菌種，或察看細(xì)菌的某些生化特征和動力。具體操作如下：

　?。?）用左手握住菌種管和斜面培育基底部，右手持接種環(huán)或接種針。

　　（2）用右手小指與手掌、小指與無名指分辨拔出兩管的棉塞，將管口通過分焰滅菌。

　?。?）用接種環(huán)或接種針伸入菌種管內(nèi)，挑取用來移種的菌落。

　　（4）伸入斜面培養(yǎng)管內(nèi)，先從斜面底部到頂端拖一條接種線，再自下而上蜿蜒劃線，或直接自下而上地蜿蜒劃線。

　　（5）接種完成之后，用火焰滅菌培養(yǎng)管口，并塞上棉塞，置于37℃培養(yǎng)。

　　鑒定用度。門診病人在檢驗(yàn)記載單上記載住址、接洽電話等信息。將尿標(biāo)本混勻，用10μl（可用定量加液器）定量接種環(huán)立即接種血瓊脂平板、麥康凱平板、TM巧克力平板，分別細(xì)菌和菌落計(jì)數(shù)。

　　中細(xì)菌數(shù)，若平板上菌落數(shù)超過l 000個(gè)，則報(bào)告：菌落數(shù)>105CFU/ml。

　　3．傾瀉平板法取被檢尿液0.1ml，參加9.9ml無菌生理鹽水中充足混勻，取此液lml放進(jìn)直徑為9cm的無菌平皿內(nèi)，同時(shí)參加已熔化并冷卻至50℃的瓊脂培育基與尿

　　液混勻，凝固后置35℃培養(yǎng)24h，計(jì)數(shù)生長菌落乘l00即為每毫升的菌落數(shù)。

　　七.液體造就基接種法

　　1.取菌：用滅菌接種環(huán)挑取菌落或標(biāo)本。

　　2.接種：用左手握住液體培養(yǎng)基試管底部，將細(xì)菌在試管內(nèi)壁與液面接壤處輕輕研磨，使細(xì)菌均勻得散落在液體培養(yǎng)基中。

　　八.微生物檢驗(yàn)技巧基礎(chǔ)操作項(xiàng)目

　　一、油鏡應(yīng)用和維護(hù)

　　二、細(xì)菌不染色標(biāo)本檢查法

　　三、革蘭氏染色法

　　四、抗酸染色法

　　五、細(xì)菌造就基的制備

　　六、細(xì)菌的接種

　　七、細(xì)菌的培育

　　八、細(xì)菌的生化反映實(shí)驗(yàn)

　　九、藥物敏感實(shí)驗(yàn)

　　3. 培養(yǎng)：接種完畢，置37℃孵育培養(yǎng)24小時(shí)后觀察成果。


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