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      http://www.hkxccw.cn 來源:原創(chuàng) 日期:2010-12-20 9:34:56
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        1. 光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)組成:根本結(jié)構(gòu)包括光學(xué)系統(tǒng)和機(jī)械系統(tǒng)兩大部分。光學(xué)系統(tǒng)是顯微鏡的主體部分,包括物鏡、目鏡、聚光鏡及反光鏡等組成的照明裝置。機(jī)械系統(tǒng)是為了保證光學(xué)系統(tǒng)的成像而配置的,包括調(diào)焦系統(tǒng)、載物臺(tái)和物鏡轉(zhuǎn)換器等運(yùn)動(dòng)夾持部件以及底座、鏡臂、鏡筒等支撐部件。照明設(shè)置的主要部件有光源、濾光器、聚光鏡和玻片等。

        2. 電阻抗血細(xì)胞分析技術(shù)的運(yùn)用及缺陷:利用:電阻抗原理可進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分群、血小板計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞均勻體積和血小板均勻體積測定及獲得其他相干參數(shù)等。毛?。孩侔准?xì)胞分類計(jì)數(shù)不特異;②技巧所限,影像紅細(xì)胞有關(guān)參數(shù)的正確性;③血小板計(jì)數(shù)的干擾因素多;④不易發(fā)明異常細(xì)胞。

        3. 電阻抗(庫爾特)血細(xì)胞檢測原理:血細(xì)胞與等滲的電解質(zhì)溶液相比為相對(duì)的不良導(dǎo)體,其電阻值大于稀釋溶液的電阻值;當(dāng)血細(xì)胞通過檢測器的孔徑感受區(qū)時(shí),檢測器內(nèi)外電極之間的恒流源電路的電阻值瞬間增大,產(chǎn)生電壓脈沖信號(hào);脈沖信號(hào)數(shù)即是通過的細(xì)胞數(shù),脈沖信號(hào)幅度大小與細(xì)胞大小成正比。

        4. 血凝儀常用檢測原理:①凝固法:通過檢測血漿在凝血激活劑作用下一系列物理量(光、電、超聲、機(jī)械活動(dòng)等)的變化,再由盤算機(jī)分析所得到數(shù)據(jù)并將之換算成終極成果,故也稱為生物物理法。按丈量原理可分為電流法、超聲分析法、光學(xué)法和磁珠法四種。②底物顯色法:通過測定產(chǎn)色底物的吸光度變更來推測所測物質(zhì)的含量和活性,故也稱為生物化學(xué)法。③免疫學(xué)辦法:以純化的被檢物資為抗原,制備相應(yīng)的抗體,然后應(yīng)用抗原抗體反映對(duì)被檢物進(jìn)行定性或定量測定。試驗(yàn)室使用的方式有:免疫擴(kuò)散法、火箭電泳法、雙向免疫電泳法、酶標(biāo)法、免疫比濁法。血凝儀使用免疫比濁法。

        5. 尿液分析儀的檢測原理:把試劑帶浸進(jìn)尿液中后,除了空缺塊外,其余的試劑塊都因和尿液產(chǎn)生了化學(xué)反映而產(chǎn)生了顏色的變更。試劑塊的色彩深淺與光的接收和反射水平有關(guān),顏色越深,相應(yīng)某種成分濃度越高,接收光量值越大,發(fā)射光量值越小,反射率也越小。反之,反射率越大。即色彩的深淺與光的反射率成比例關(guān)系,而顏色的深淺又與尿液中各種成分的濃度成比例關(guān)系。所以只要測得光的反射率既可以求得尿液中各種成分的濃度。

        6. 酶標(biāo)儀的性能評(píng)價(jià)指標(biāo):酶標(biāo)儀的性能評(píng)價(jià)指標(biāo)有濾光片波長精度檢討及其峰值測定、敏銳度和正確度、通道差與孔間差檢測、零點(diǎn)漂移、精密度評(píng)價(jià)、線性測定、雙波長評(píng)價(jià)等。

        7. 電化學(xué)反對(duì)數(shù)放大器的作用:電解質(zhì)分析儀,測無機(jī)離子及血?dú)馄饰鲋袦y二氧化碳,在信號(hào)處置中,應(yīng)用反對(duì)數(shù)放大器,原因是,其電極測定的是電位差,而依據(jù)Nernst方程電位差與離子的活度(濃度)的對(duì)數(shù)值成線性,故求離子活度時(shí),要通過反對(duì)數(shù)放大器將點(diǎn)位差取反對(duì)數(shù)。

        8. 臨床檢驗(yàn)儀器分類:通常以臨床檢驗(yàn)的辦法為主對(duì)臨床檢驗(yàn)儀器進(jìn)行分類,或以檢驗(yàn)儀器的工作原理為主對(duì)臨床檢驗(yàn)儀器進(jìn)行分類。

        9. 臨床檢驗(yàn)儀器常用的性能指標(biāo):一個(gè)精良的檢驗(yàn)儀器應(yīng)具有的性能指標(biāo)有:敏銳度好、精度高、噪音小、誤差小、辨別率高、可靠性、反復(fù)性好、響應(yīng)敏捷、線性范疇寬和穩(wěn)固性好。

        10. 光學(xué)顯微鏡工作原理:顯微鏡是由兩組會(huì)聚透鏡組成的光學(xué)折射成像體系,應(yīng)用光學(xué)原理,把人眼所不能辨別的渺小的物體放大成像,供人們提取物資微細(xì)構(gòu)造信息的光學(xué)儀器。把焦距較短、靠近視察物、成實(shí)像的透鏡組成為物鏡,而焦距較長,靠近眼鏡、成虛像的透鏡組成為目鏡。被察看物體位于物鏡的前方,被物鏡作第一級(jí)放大后成一倒立的實(shí)像,然后此實(shí)像再被目鏡作第二級(jí)放大,得到Zui大放大后果的倒立的虛像,位于人眼的明視間隔處。

        11. 光學(xué)顯微鏡的性能參數(shù)有哪些,這些參數(shù)間的影響和制約關(guān)系如何:顯微鏡的性能參數(shù)重要有放大率、數(shù)值孔徑、分辯率、視場、景深與焦長、鏡像亮度、鏡像清楚度、工作間隔和機(jī)械筒長。顯微鏡的數(shù)值孔徑與其放大率成正比,與分辨率、景深成反比,它的平方與圖像亮度成正比。因此,應(yīng)用較大數(shù)值孔徑的物鏡,其放大率和辨別本事較高,但視場、景深、工作間隔較小。

        13. 掃描電鏡與透射電鏡相比有哪些特色:①能夠直接視察你樣品表面的結(jié)構(gòu),樣品的尺寸可大至120mm*80mm*50mm;②樣品制備過程簡略,不用切成薄片;③樣品可以在樣品室中作三度空間的平移和旋轉(zhuǎn),因此,可以從各種角度對(duì)樣品進(jìn)行察看;④景深大,圖像富有立體感。掃描電鏡的景深較光學(xué)顯微鏡大幾百倍,比透射電鏡大幾十倍;⑤圖像的放大規(guī)模廣,分辯率也比擬高??煞糯笫畮妆兜綆资f倍,它基礎(chǔ)上包括了從放大鏡、光學(xué)顯微鏡直到透射電鏡的放大范疇,分辯率介于光學(xué)顯微鏡與透射電鏡之間,可達(dá)3nm;⑥電子束對(duì)樣品的損傷與污染水平較??;⑦在察看形貌的同時(shí),還可利用從樣品發(fā)出的其他信號(hào)作微區(qū)成分分析。

        14. 光學(xué)顯微鏡與電子顯微鏡的主要差別:①照明源不同②透鏡不同③成像原理不同④所用標(biāo)本制備方法不同。

        15. 離心機(jī)的工作原理:離心是利用旋轉(zhuǎn)活動(dòng)的離心力以及物質(zhì)的沉降系數(shù)或浮力密度的差別進(jìn)行分別、濃縮和提純生物樣品的一種辦法。懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下,由于宏大的離心力作用,使懸浮的渺小顆粒以必定的速度沉降,從而使溶液得以分別。顆粒的沉降速度取決于離心機(jī)的轉(zhuǎn)速、顆粒的質(zhì)量、大小和密度。微粒在重力場下移動(dòng)的速度與微粒的大小、形態(tài)、密度、重力場的強(qiáng)度及液體的粘度有關(guān)。離心機(jī)就是利用離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強(qiáng)盛的離心力,迫使液體中微粒戰(zhàn)勝擴(kuò)散加快沉降速度,把樣品中就有不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質(zhì)分分開。

        16. 常用的離心方式:平衡離心法、等密度離心法、經(jīng)典式沉降平衡離心法。

        17. 什么是速率區(qū)帶離心法:速率區(qū)帶離心方式是依據(jù)分離的粒子在離心力作用下,在梯度液中沉降速度的不同,離心后具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度層內(nèi)形成幾條離開的樣品區(qū)帶,到達(dá)彼此分別的目標(biāo)。

        18. 什么是等密度區(qū)帶離心法:當(dāng)不同顆粒存在浮力密度差時(shí),在離心力場下,顆?;蛳蛳鲁两?,或向上浮起,一直沿梯度移動(dòng)到它們密度恰好相等的地位上(即等密度點(diǎn))形成區(qū)帶,稱為等密度區(qū)帶離心法。

        19. 離心機(jī)主要技術(shù)參數(shù):Zui大轉(zhuǎn)數(shù):離心轉(zhuǎn)頭可到達(dá)的Zui大轉(zhuǎn)速,單位是rpm。Zui大離心力:離心機(jī)可產(chǎn)生的Zui大相對(duì)離心力場RCF,單位是g。Zui大容量:離心機(jī)一次可分離樣品的Zui大體積,通常表現(xiàn)為m*n,m為一次可容納的Zui多離心管數(shù),n為一個(gè)離心管課容納分離樣品的Zui大體積,單位是ml。調(diào)速規(guī)模:離心機(jī)磚頭轉(zhuǎn)速可調(diào)劑的范圍。溫度把持規(guī)模:離心機(jī)工作時(shí)可節(jié)制的樣品溫度范疇。工作電壓:一般指離心機(jī)電極工作所需的電壓。電源功率:通常指離心機(jī)電機(jī)的額定功率。

        20. 離心轉(zhuǎn)頭常用標(biāo)志:FA固定角轉(zhuǎn)頭 V垂直轉(zhuǎn)頭 SW甩平式轉(zhuǎn)頭 CF持續(xù)流動(dòng)轉(zhuǎn)頭 Z區(qū)帶轉(zhuǎn)頭 Ti鈦或鈦合金制成

        21. 在電解分析儀中,如何進(jìn)行電極系統(tǒng)的頤養(yǎng):電極系統(tǒng)的頤養(yǎng)重要包含鈉電極、鉀電極、氯電極和參比電極的保養(yǎng)。保持逐日用廠家供給的干凈液和鈉電極調(diào)劑液進(jìn)行清洗和調(diào)劑時(shí)Zui基礎(chǔ)的頤養(yǎng)。鉀電極為選擇性膜電極,應(yīng)用過程中會(huì)吸附蛋白質(zhì),影響電極的響應(yīng)敏銳度。每月至少調(diào)換一次內(nèi)充液。氯電極為選擇性膜電極,使用進(jìn)程中亦會(huì)吸附蛋白質(zhì),Zui好用物理法進(jìn)行膜電極的干凈。每周均須要檢討參比電極內(nèi)是否足夠的飽和氯化鉀溶液及氯化鉀殘片。一般三個(gè)月要換一次參比電極膜。

        22. 簡述血?dú)夥治鰞x的基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)及工作原理:血?dú)夥治鰞x的根本構(gòu)造可分為電極、管路和電路三大部分,其工作原理:被測血液樣品在管路系統(tǒng)的抽吸下,進(jìn)入樣品室內(nèi)的測量毛細(xì)管中。丈量毛細(xì)管的管壁上開有四個(gè)孔,孔內(nèi)分辨插有PH、PCO2和PO2三支測量電極和一支參比電極。其中,PH和PH參比電極共同組成對(duì)PH值的測量系統(tǒng)。血液樣品進(jìn)進(jìn)樣品室的測量管后,管路系統(tǒng)結(jié)束抽吸,樣品同時(shí)被四個(gè)電極所感測,。電極發(fā)生對(duì)應(yīng)于PH、PCO2和PO2三項(xiàng)參數(shù)的電信號(hào),這些電信號(hào)分辨經(jīng)放大、模數(shù)轉(zhuǎn)換后送到微處理機(jī)。經(jīng)微處置機(jī)系統(tǒng)處理、預(yù)算后,再分離送到各自的顯示單元顯示或打印機(jī)打印出測量成果。測量系統(tǒng)的所有部件包含溫度把持、管道系統(tǒng)的動(dòng)作等均由微機(jī)或盤算機(jī)芯片節(jié)制。

        23. 在血?dú)夥治鰞x中,如何對(duì)PH電機(jī)進(jìn)行保養(yǎng):PH電極的保養(yǎng)方法是:假如PH電極在空氣中裸露2h以上,應(yīng)將其放在緩沖液中浸泡6h~24h才干使用。血液中的蛋白質(zhì)輕易粘附在電極表面,必需經(jīng)常按血液→緩沖液(或生理鹽水)→水→空氣的次序進(jìn)行清洗。亦可用隨機(jī)附送的含蛋白水解酶的清洗液或自配的0.1%胃蛋白酶鹽酸溶液浸泡30分鐘以上,用生理緩沖液洗凈后浸泡備用。若清洗后仍不能正常工作,應(yīng)調(diào)換電極。

        24. 主動(dòng)化血培養(yǎng)檢測和剖析系統(tǒng)按檢測原理可分為哪幾類以及各類型的工作原理:以檢測培養(yǎng)基導(dǎo)電性和電壓為基本的血培育系統(tǒng):血造就基中因含有不同電解質(zhì)而具有必定導(dǎo)電性。微生物在生長代謝的過程中可發(fā)生質(zhì)子、電子和各種帶電荷的原子團(tuán),通過電極檢測造就基的導(dǎo)電性或電壓可判定有無微生物生長;利用測壓原理的血培養(yǎng)系統(tǒng):很多細(xì)菌生長進(jìn)程中,常伴有接收或產(chǎn)賭氣體現(xiàn)象,因此可應(yīng)用培育瓶內(nèi)壓力的轉(zhuǎn)變檢測微生物的生長情形;采取光電原理監(jiān)測的血培養(yǎng)體系:微生物在代謝過程中產(chǎn)生的CO2引起造就基pH值及氧化還原電位轉(zhuǎn)變。利用光電比色檢測血培養(yǎng)瓶中某些代謝產(chǎn)物量的轉(zhuǎn)變,可斷定有無微生物生長。

        25. 采取光電原理監(jiān)測的血培育系統(tǒng),按檢測手腕可分為哪幾類:可分成BioArgos系統(tǒng)、BacT/Alert系統(tǒng)、Bactec9000系列和Vital體系等四類。

        26. 簡述流式細(xì)胞儀生物學(xué)顆粒分析原理:經(jīng)特異熒光染料染色后的樣品沿流動(dòng)室的軸心向下賤動(dòng),流動(dòng)室軸心至外壁的鞘液也向下賤動(dòng),形成包繞細(xì)胞懸液的鞘液流,鞘液和樣品流在噴嘴鄰近組成一個(gè)圓柱流束,與程度方向的激光束垂直相交。染色的細(xì)胞受激光照耀后發(fā)出熒光,這些信號(hào)分辨被光電倍增管接受,經(jīng)過計(jì)算機(jī)儲(chǔ)存、盤算、分析這些數(shù)字化信息,就可得到細(xì)胞的大小、活性、核酸含量、酶和抗原的性質(zhì)等物理和生化指標(biāo)。

        27. 簡述流式細(xì)胞儀細(xì)胞分選原理:當(dāng)某類細(xì)胞的特征與要分選的細(xì)胞雷同時(shí),流式細(xì)胞儀就會(huì)在這類細(xì)胞形成液滴時(shí)給含有這類細(xì)胞的液滴充以特定的電荷,帶有電荷的液滴向著落入偏轉(zhuǎn)板間的靜電場時(shí),依所帶電荷的不同分離向左偏轉(zhuǎn)或向右偏轉(zhuǎn),落入指定的收集器內(nèi),不帶電的液滴不產(chǎn)生偏轉(zhuǎn),垂直落入廢液槽中被排出,從而到達(dá)細(xì)胞分類收集的目標(biāo)。

        28. 流式細(xì)胞儀所檢測的信號(hào)有哪些?這些信號(hào)所代表的意義和作用是什么:流式細(xì)胞儀所檢測的信號(hào)有散射光和熒光信號(hào)。散射光信號(hào):散射光分為前向角散射和側(cè)向角散射,兩個(gè)參數(shù)組合,可區(qū)分經(jīng)裂解紅細(xì)胞處置后外周血白細(xì)胞中淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和粒細(xì)胞三個(gè)細(xì)胞群體,或在未驚醒裂解紅細(xì)胞處理的全血樣品找出血小板和紅細(xì)胞等細(xì)胞群體。熒光信號(hào):一種是細(xì)胞自身在激光照耀下發(fā)出微弱的熒光信號(hào),另一種是經(jīng)過特異熒光素標(biāo)志細(xì)胞后,受激發(fā)照射得到的熒光信號(hào),通過對(duì)這類熒光信號(hào)的檢測和定量分析能懂得所研討細(xì)胞的存在和定量。

        29. 結(jié)合檢測型BCA在白細(xì)胞分類上主要有哪些技術(shù):①電容、電導(dǎo)、光散射結(jié)合檢測技術(shù)②電阻抗、射頻與細(xì)胞化學(xué)結(jié)合檢測技術(shù)③多角度激光散射、電阻抗聯(lián)合檢測技術(shù)④光散射與細(xì)胞化學(xué)檢測技術(shù)。

        30. 簡述雙磁路磁珠法的測定原理:屬磁電檢測原理。在測試杯的兩側(cè)各有一組驅(qū)動(dòng)線圈,它們產(chǎn)生恒定的交替電磁場,使測試杯內(nèi)特制的往磁小鋼珠堅(jiān)持等振幅振蕩運(yùn)動(dòng);凝血酶激活劑參加后,隨著纖維蛋白的增多,小鋼珠的運(yùn)動(dòng)振幅逐漸削弱;另一組丈量線圈感應(yīng)到小鋼珠運(yùn)動(dòng)變化;儀器將活動(dòng)幅度衰減到50%時(shí)斷定為凝固終點(diǎn)。

        31. 簡述試劑帶構(gòu)造:采取多層膜結(jié)構(gòu),第一層尼龍膜起到維護(hù)作用,防止大分子物質(zhì)對(duì)反響的污染;二層絨制層,包含碘酸鹽層的試劑層, 碘酸鹽層可損壞維生素C等干擾物質(zhì),測量顯微鏡,試劑層含有試劑成分,重要與尿液中所測定物資產(chǎn)生化學(xué)反映,發(fā)生色彩變更;第三層是固定有試劑的吸水層,可使尿液均勻快速地浸進(jìn),并能克制尿液流到相鄰反響區(qū);Zui后一層選取尿液不浸潤的塑料片作為支撐體。

        32. 尿沉渣分析儀的幾大類型:迄今為止尿沉渣剖析儀大致有兩類,一類是通過尿沉渣直接鏡檢再進(jìn)行影像分析,得出相應(yīng)的技巧材料與試驗(yàn)成果;另一類是流式細(xì)胞術(shù)分析。

        33. 簡述流式細(xì)胞術(shù)尿沉渣分析儀的工作原理:測定是利用流式細(xì)胞術(shù)的電阻抗原理進(jìn)行的。當(dāng)一個(gè)尿標(biāo)本被稀釋并經(jīng)染色后,靠液壓作用通過鞘液流動(dòng)池。反響樣品從樣品噴嘴出口進(jìn)入鞘液流動(dòng)室時(shí),被一種無粒子顆粒的鞘液包抄,使每個(gè)細(xì)胞以單個(gè)縱列的情勢通過流動(dòng)池的中心軸線,在這里每個(gè)尿液細(xì)胞被氬激光光束照耀。每個(gè)細(xì)胞有不同水平的熒光強(qiáng)度、前向散射光強(qiáng)度和電阻抗的大小。儀器將這種熒光,散射光等光信號(hào)改變成電信號(hào),并對(duì)各種信號(hào)進(jìn)行分析,Zui后得到每個(gè)尿液標(biāo)本產(chǎn)生出的直方圖和散射圖。通過火析這些圖形,即可區(qū)分每個(gè)細(xì)胞并得出有關(guān)細(xì)胞的形態(tài)。

        34. PCR分類:普通PCR擴(kuò)增儀和實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增儀,其中普通PCR擴(kuò)增儀包括普通定性PCR擴(kuò)增儀、梯度PCR儀、原位PCR儀,普通定性PCR擴(kuò)增儀又分為水浴式PCR儀、變溫金屬塊式PCR儀、變溫氣流式PCR儀。實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增儀包括金屬板式實(shí)時(shí)定量PCR儀、離心式實(shí)時(shí)定量PCR儀、各孔獨(dú)立控溫的定量PCR儀

        35. 什么是聚合酶鏈(PCR)技術(shù):PCR技巧的實(shí)質(zhì)是核酸擴(kuò)增技術(shù),通過加熱使雙鏈DNA解開螺旋,在退火溫度條件下引物同模板DNA雜交,在TaqDNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和適合的PH緩沖液存在條件下延長引物,反復(fù)上述“變性→退火→引物→延長”進(jìn)程至25-40個(gè)循環(huán),呈指數(shù)級(jí)擴(kuò)展待測樣本中的核酸拷貝數(shù),可以在體外對(duì)目標(biāo)核酸進(jìn)行大批復(fù)制。

        計(jì)算題公式

        離心力 FC=mω2r=m(2πN/60)2r=(4π2N2rm)/3600 ω是旋轉(zhuǎn)角速度,N是每分鐘轉(zhuǎn)頭旋轉(zhuǎn)次數(shù),r是離心半徑,m是質(zhì)量。相對(duì)離心力:RCF=FC/mg 沉降系數(shù):(dx/dt)/ω2r 離心場力: rω2


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