一般顯微鏡都有三個或多個物鏡大夫應(yīng)用顯微鏡進行病理視察時,為什么幾個物鏡輪換應(yīng)用?
以獲得不同放大倍數(shù)及視察后果。
(一)、物鏡
物鏡是決議顯微鏡性能的Zui主要部件,安裝在物鏡轉(zhuǎn)換器上,接近被視察的物體,故叫做物鏡或接物鏡。
1、物鏡的分類
物鏡依據(jù)應(yīng)用條件的不同可分為干燥物鏡和浸液物鏡;其中浸液物鏡又可分為水浸物鏡和油浸物鏡(常用放大倍數(shù)為90—100倍)。
依據(jù)放大倍數(shù)的不同可分為 低倍物鏡(10倍以下)、中倍物鏡(20倍左右)高倍物鏡(40—65倍)。
依據(jù)像差改正情形,分為消色差物鏡(常用,能改正光譜中兩種色光的色差的物鏡)和復(fù)色差物鏡(能改正光譜中三種色光的色差的物鏡,價錢貴,使用少)。
2、物鏡的重要參數(shù):
物鏡重要參數(shù)包含:放大倍數(shù)、數(shù)值孔徑和工作距離。
①、放大倍數(shù)是指眼睛看到像的大小與對應(yīng)標(biāo)本大小的比值。它指的是長度的比值而不是面積的比值。例:放大倍數(shù)為100×,指的是長度是1μm的標(biāo)本,放大后像的長度是100μm,要是以面積盤算,則放大了10,000倍。
顯微鏡的總放大倍數(shù)即是物鏡和目鏡放大倍數(shù)的乘積。
②、數(shù)值孔徑也叫鏡口率,簡寫NA 或A,是物鏡和聚光器的重要參數(shù),與顯微鏡的分辨力成正比。干燥物鏡的數(shù)值孔徑為0.05-0.95,油浸物鏡(香柏油)的數(shù)值孔徑為1.25。
③、工作距離是指當(dāng)所察看的標(biāo)本Zui明白時物鏡的前端透鏡下面到標(biāo)本的蓋玻片上面的距離。物鏡的工作距離與物鏡的焦距有關(guān),物鏡的焦距越長,放大倍數(shù)越低,其工作間隔越長。例:10倍物鏡上標(biāo)有10/0.25和160/0.17,其中10為物鏡的放大倍數(shù);0.25為數(shù)值孔徑;160為鏡筒長度(單位mm);0.17為蓋玻片的尺度厚度(單位 mm)。10倍物鏡有效工作距離為6.5mm,40倍物鏡有效工作距離為0.48mm 。
3、物鏡的作用是將標(biāo)本作第一次放大,它是決定顯微鏡性能的Zui主要的部件——分辨力的高下。
分辨力也叫分辨率或分辨本事。分辨力的大小是用分辨距離(所能分辯開的兩個物點間的Zui小距離)的數(shù)值來表現(xiàn)的。在明視距離(25cm)之處,正凡人眼所能看清相距0.073mm的兩個物點,這個0.073mm的數(shù)值,即為正凡人眼的分辨距離。顯微鏡的分辨距離越小,即表現(xiàn)它的分辨力越高,也就是表現(xiàn)它的性能越好。
顯微鏡的分辯力的大小由物鏡的辨別力來決定的,而物鏡的分辨力又是由它的數(shù)值孔徑和照明光線的波長決議的。
當(dāng)用普通的中心照明法(使光線均勻地透過標(biāo)本的明視照明法)時,顯微鏡的辨別間隔為d=0.61λ/NA
式中d——物鏡的辨別間隔,單位 nm。
λ——照明光線波長,單位 nm。
NA ——物鏡的數(shù)值孔徑
例如油浸物鏡的數(shù)值孔徑為1.25,可見光波長范疇為400—700nm ,取其均勻波長550 nm,則d=270 nm,約即是照明光線波長一半。一般地,用可見光照明的顯微鏡分辨力的極限是0.2μm。
(二)、目鏡
由于它靠近察看者的眼睛,因此也叫接目鏡。安裝在鏡筒的上端。
1、目鏡的構(gòu)造
通常目鏡由高低兩組透鏡組成,上面的透鏡叫做接目透鏡,下面的透鏡叫做會聚透鏡或場鏡。高低透鏡之間或場鏡下面裝有一個光闌(它的大小決議了視場的大?。?,由于標(biāo)本正好在光闌面上成像,可在這個光闌上粘一小段毛發(fā)作為指針,用來唆使某個特色的目的。也可在其上面放置目鏡測微尺,用來丈量所察看標(biāo)本的大小。
目鏡的長度越短,放大倍數(shù)越大(因目鏡的放大倍數(shù)與目鏡的焦距成反比)。
2、目鏡的作用
是將已被物鏡放大的,分辯清楚的實像進一步放大,到達人眼能輕易分辨明白的水平。
常用目鏡的放大倍數(shù)為5—16倍。
3、目鏡與物鏡的關(guān)系
物鏡已經(jīng)分辨明白的細微構(gòu)造,假如沒有經(jīng)過目鏡的再放大,達不到人眼所能分辨的大小,那就看不清晰;但物鏡所不能分辨的細微構(gòu)造,固然經(jīng)過高倍目鏡的再放大,也還是看不清晰,所以目鏡只能起放大作用,不會進步顯微鏡的分辨率。有時固然物鏡能分辨開兩個靠得很近的物點,但由于這兩個物點的像的距離小于眼睛的分辨距離,還是無法看清。所以,目鏡和物鏡即相互接洽,又彼此制約。
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