臨床微生物實(shí)驗(yàn)室一般應(yīng)配備以下設(shè)備和器具:孵育溫箱、高壓滅菌設(shè)備、顯微鏡、冰箱、CO 2 培養(yǎng)設(shè)備、pH 計(jì)、厭氧培養(yǎng)設(shè)備、離心機(jī)、接種用具、火焰燈、各種玻璃器皿、天平、各種塑料器皿。
1、孵育溫箱是進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)的基礎(chǔ)裝備,可調(diào)溫度規(guī)模應(yīng)由室溫至60攝氏度,溫箱的內(nèi)容積可依據(jù)實(shí)際請(qǐng)求選擇。培養(yǎng)一般的細(xì)菌,溫箱的溫度應(yīng)定在35 ± 1 攝氏度??梢啦煌奈⑸镌炀鸵?,設(shè)定不同溫度的溫箱,如真菌25 - 26攝氏度,曲折菌43 攝氏度。溫箱在使用時(shí),箱內(nèi)必須放置一只溫度計(jì),或設(shè)有另外的溫度指導(dǎo)儀表,唆使溫度。天天凌晨第一次開(kāi)啟溫箱門(mén)后,首先察看溫度,并將溫度記載在質(zhì)控圖表中,一旦發(fā)明溫度超越把持范疇,應(yīng)及時(shí)調(diào)劑。溫箱溫度正常的波動(dòng)幅度應(yīng)為所定溫度土1 攝氏度。如定在35 攝氏度的溫箱,溫度的幅度為34- 36攝氏度。溫箱內(nèi)要堅(jiān)持一定的濕度。
2、 顯微鏡
顯微鏡是察看細(xì)菌菌體形態(tài)及標(biāo)本直接鏡檢的基礎(chǔ)設(shè)備。
一般的光學(xué)顯微鏡就可以滿(mǎn)足慣例請(qǐng)求。顯微鏡的目鏡常用5 x ,8 x 、10 x , 接物鏡有20 x 、40 x和100 x (油鏡)。細(xì)菌檢驗(yàn)油鏡Zui常用,應(yīng)注意維護(hù)。天天工作停止后,利用含少量二甲苯的擦鏡紙,擦往油鏡頭上的顯微鏡油,再用干凈擦鏡紙擦拭清潔,勿沾留二甲苯。用暗視野察看細(xì)菌活動(dòng)性,是較好的辦法。如無(wú)專(zhuān)門(mén)的暗視野裝備,可用普通顯微鏡改制。辦法是在聚光器的玻璃上,貼一張用黑紙剪成的圓紙片,其大小比聚光器略小,光線(xiàn)僅從聚光器邊沿進(jìn)入鏡頭,調(diào)節(jié)進(jìn)光量,即可達(dá)到暗視野的后果。依據(jù)須要如用金胺-羅丹明抗酸染色法鏡檢分枝桿菌時(shí),可配備熒光顯微鏡。
3、CO 2 造就
裝備用于分別造就須要CO 2 氣體生長(zhǎng)的細(xì)菌?,F(xiàn)已有專(zhuān)用的CO 2 培養(yǎng)箱出售,可以使用。但對(duì)于慣例試驗(yàn)室, CO2 培育箱本錢(qián)太高,一般用燭炬罐即可滿(mǎn)足請(qǐng)求。以真空干燥罐、標(biāo)本缸,甚至厭氧培養(yǎng)罐作為燭炬罐。將接種的平板或試管放在罐內(nèi),然后放進(jìn)點(diǎn)燃的燭炬,將罐蓋蓋上并密閉,蠟燭耗費(fèi)罐內(nèi)的氧氣,自行熄滅,即到達(dá)了所需的3% -5% 的CO2 濃度。也可用化學(xué)試劑產(chǎn)氣法:每升體積需枸櫞酸(C6Hg0 7 )0.33 g ,碳酸氫鈉(NaHCO, ) 0.37 g。兩試劑放置一小燒杯中混雜,向燒杯中參加10 ml 蒸餾水,也即移入罐中,將罐封閉。如此發(fā)生的CO2環(huán)境也比擬幻想,罐內(nèi)堅(jiān)持必定濕度。
4、 厭氧培養(yǎng)設(shè)備
用于分離和培養(yǎng)僅在無(wú)氧環(huán)境中才生長(zhǎng)的細(xì)菌。厭氧培養(yǎng)所需的設(shè)備主要有3 種:厭氧箱、厭氧罐、厭氧袋。厭氧箱可以接收處置大批標(biāo)本。接種、分離培養(yǎng)和鑒定均在箱內(nèi)進(jìn)行,因而保證全部操作進(jìn)程均處于無(wú)氧狀況。厭氧箱本錢(qián)高, 且保持日常工作用度大,不太實(shí)用于小型常規(guī)實(shí)驗(yàn)室。厭氧罐是塑料或者金屬制成,其中可放入15 個(gè)左右的瓊脂平板,本錢(qián)低、用度小,較合適慣例實(shí)驗(yàn)室。厭氧罐只能供給培養(yǎng)時(shí)的無(wú)氧環(huán)境。厭氧袋僅作為一次性使用。每只厭氧袋可裝入1 - 2 個(gè)平板,適介小量標(biāo)本的厭氧培養(yǎng)。
5、接種用具
接種用具可以分為接種環(huán)和接種針兩類(lèi)。接種環(huán)用來(lái)挑取標(biāo)本、菌液及平板劃線(xiàn)等。接種針則用來(lái)挑取單個(gè)菌落,穿刺高層瓊脂等。為了實(shí)用于不同的需要,接種器可以做成各種樣式。接種環(huán)的直徑一般為2 - 4 mm ,也可自定。古老的接種環(huán)是用白金制戚,故也稱(chēng)白金耳。白金絲易于傳熱散熱,火焰滅菌后冷卻快,且經(jīng)久耐用,不生銹。但因其昂貴,目前多用其他較廉價(jià)的合金取代。市上有制備好的鎳鉻絲接種環(huán)出售。假如自制,可用300 -500 W 的電熱絲,但電熱絲制備的接種環(huán),經(jīng)一段時(shí)光火焰燒灼后會(huì)氧化粗糙,應(yīng)及時(shí)調(diào)換。
6、 平皿
平皿是制備瓊脂平板必需用的器皿。傳統(tǒng)平皿是用玻璃制成的,現(xiàn)在有塑料制的一次性使用無(wú)菌平皿。平皿的直徑有多種規(guī)格,常用的有60 mm 、90 mm 、100 mm 等。做紙片法藥敏實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)使用 90 mm以上直徑的平皿。
7、高壓滅菌設(shè)備
高壓滅菌器是細(xì)菌室必備設(shè)備,用于培養(yǎng)基及其他物品的滅菌。高壓鍋有立式、臥式之分。也有比擬小型的手提式高壓鍋,實(shí)用于小型實(shí)驗(yàn)室。由于熱源不同,又可分為蒸汽式和電熱式,不同的實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)具體的情形選用。
8、冰箱和冷躲柜
冰箱和冷躲柜用于儲(chǔ)存培養(yǎng)基、診斷用血清、菌種、藥物、抗生素等。應(yīng)備有4攝氏度冷藏和-20攝氏度冷凍功效的普通冰箱,以供日常所用。有條件試驗(yàn)室可配備- 70攝氏度超低溫冰箱,可供菌株的長(zhǎng)期保留等。
9、火焰燈
火焰燈是接種器滅菌及試管口等物品消毒處置的必備設(shè)備。煤氣燈是較幻想的接種環(huán)滅菌設(shè)備,火焰的大小可根據(jù)需要自行調(diào)節(jié)?;鹧嫘钥煞譃閮蓪?外焰和內(nèi)焰。外焰由于接觸氧氣豐盛,熱度很高,所以燒灼接種環(huán)或物品時(shí)應(yīng)使用外焰。無(wú)煤氣源的處所,可使用酒精燈,但溫度不足煤氣燈。近年來(lái),市面上有電熱接種環(huán)滅菌器,使用比擬安全,沒(méi)布明火,且滅菌時(shí),接種環(huán)上的細(xì)菌不會(huì)四濺,合適于生物安全柜內(nèi)操作。
10、 醫(yī)療機(jī)構(gòu)的臨床細(xì)菌室,依據(jù)各自的等級(jí),相應(yīng)配備生物安全柜。
一、電熱恒溫培養(yǎng)箱
電熱恒溫培養(yǎng)箱,重要由箱體、電熱絲、溫度調(diào)節(jié)器等構(gòu)成。
?。ńo出溫箱圖片)
1.使用辦法
(1)接上電源插頭,開(kāi)啟電源開(kāi)關(guān),綠色指示燈明亮,表明電源接通。然后調(diào)節(jié)溫度旋鈕,選擇需要的溫度,紅色指導(dǎo)燈亮,表現(xiàn)電熱絲已在發(fā)熱,箱內(nèi)升溫。
(2)當(dāng)溫度升至所需溫度時(shí),紅、綠燈交替明亮即為所需恒溫。
2.注意事項(xiàng)
(1)溫箱必須放置在干燥安穩(wěn)處。
(2)使用時(shí),隨時(shí)注意顯示溫度是否與所需溫度雷同。
(3)除了取放培育物開(kāi)啟箱門(mén)外,盡量減少開(kāi)啟次數(shù),以免影響恒溫。
(4)工作室內(nèi)隔板放置實(shí)驗(yàn)資料不宜過(guò)重,底板為散熱板,切勿放置其他物品。
二、電熱干燥箱
電熱干燥箱,主要用于玻璃器皿和金屬制品等的干熱滅菌。箱內(nèi)放置物品要留空隙,保持熱空氣流動(dòng),以利徹底滅菌。常用滅菌溫度160℃,保持2h。滅菌時(shí),關(guān)門(mén)加熱應(yīng)開(kāi)啟箱頂上的活塞通氣孔,使冷空氣排出,待升至60℃時(shí),將活塞封閉,為了避免玻璃器皿炸裂,滅菌后溫度降至60℃時(shí),才干開(kāi)啟箱門(mén)取物品。若僅需達(dá)到干烤目標(biāo),可一直開(kāi)啟活塞通氣孔,溫度只需60℃左右即可。
滅菌進(jìn)程中如遇溫度忽然升高,箱內(nèi)冒煙應(yīng)立即切斷電源,封閉排氣小孔,箱門(mén)四周用濕毛巾堵塞杜盡氧氣進(jìn)入,火則自熄。
三、高壓蒸氣滅菌器
(給出 手提式高壓蒸氣滅菌器圖片)
1.安全閥 2.壓力表 3.放氣閥 4.放氣軟管 5.內(nèi)筒 6.篩板
高壓滅菌器為一鍋爐狀的雙層金屬圓筒,外筒盛水,內(nèi)筒有一運(yùn)動(dòng)金屬隔板,隔板有很多小孔,使蒸氣流通。滅菌器上方或前方有金屬厚蓋,蓋上有壓力表、安全閥和放氣閥。蓋的邊沿附有螺旋,借以緊閉滅菌器,使蒸氣不能外溢。
在尺度大氣壓下,水的沸點(diǎn)是100℃,這個(gè)溫度只能殺逝世一般細(xì)菌的滋生體,不能殺逝世芽胞,為了進(jìn)步溫度,就須要增添壓力,壓力增大,水沸點(diǎn)升高。
因高壓蒸氣滅菌器是一個(gè)密閉的容器,因此,加熱時(shí)蒸氣不能外溢,隨鍋內(nèi)壓力不斷增大,使水的沸點(diǎn)超過(guò)100℃,當(dāng)壓力到1×105Pa(121.3℃)經(jīng)30min,即可殺滅所有的微生物。
1.應(yīng)用方式
(1)加適量水于滅菌器外筒內(nèi),使水面略低于支架,放進(jìn)內(nèi)筒,將滅菌物品包扎好放進(jìn)其內(nèi)。
(2)將蓋蓋好,對(duì)稱(chēng)扭緊螺旋后通電,打開(kāi)放氣閥,待水蒸氣均勻冒出時(shí),表現(xiàn)鍋內(nèi)冷空氣已排完。然后封閉放氣閥持續(xù)加熱,待滅菌器內(nèi)壓力升至約1×105Pa,經(jīng)20~30min,即可達(dá)到滅菌的目標(biāo)。
(3)滅菌時(shí)光達(dá)到后,結(jié)束加熱,待壓力降至零時(shí)才干開(kāi)蓋取物。
(4)手提式高壓滅菌器滅菌完畢,需放出器內(nèi)之水,并擦清潔。
2.注意事項(xiàng)
(1)螺旋必須均勻上緊,使蓋緊閉,以免漏氣。
(2)內(nèi)筒中的滅菌物品,不可堆壓過(guò)緊,以免妨害蒸氣流通,影響滅菌后果。
(3)凡能耐熱和濕潤(rùn)的物品,如培育基、生理鹽水、敷料、病原微生物等都可利用此法滅菌。
(4)為了到達(dá)徹底滅菌的目標(biāo),滅菌時(shí)光和壓力必需正確可靠,操作職員不能擅自分開(kāi)。
四、電冰箱
電冰箱重要由箱體、制冷體系、主動(dòng)把持體系和附件四大部分構(gòu)成。其使用方式及注意事項(xiàng)如下:
1.電冰箱應(yīng)放置在干燥透風(fēng)處,避免日光照耀,闊別熱源,離墻10cm以上,以保證對(duì)流,利于散熱。
2.電冰箱電源的電壓一般為220V,如不符合,須另裝穩(wěn)壓器穩(wěn)壓。
3.通電檢討箱內(nèi)照明燈是否明亮,機(jī)器是否運(yùn)轉(zhuǎn),生物顯微鏡價(jià)格。
4.使用時(shí),于冷凍室放置冰盒盛水3/4處,將溫度調(diào)節(jié)器調(diào)至必定刻度(冷凍室0℃以下,冷躲室溫度4~10℃)。
5.調(diào)節(jié)溫度時(shí)不可一次調(diào)得過(guò)低,以免凍壞箱內(nèi)物品。應(yīng)作第二次、第三次調(diào)劑。
6.冷凍室冰霜較厚,按化霜按鈕或切斷電路,進(jìn)行化霜,熔化后干凈收拾。
7.箱內(nèi)寄存物品不宜過(guò)擠,以利冷空氣對(duì)流,使箱內(nèi)溫度均勻。
8.箱內(nèi)堅(jiān)持干凈干燥,如有霉菌生長(zhǎng),斷電后取出物品,經(jīng)福爾馬林熏蒸消毒后,方可使用。
五、電動(dòng)離心機(jī)
試驗(yàn)室常用電動(dòng)離心機(jī)沉淀細(xì)菌、血細(xì)胞、蟲(chóng)卵和分別血清等,其轉(zhuǎn)速可達(dá)4000r/min。常用者為傾角電動(dòng)離心機(jī),其中管孔有必定傾斜角度,使沉淀物敏捷下沉。前下方裝有電源開(kāi)關(guān)和速度調(diào)節(jié)器,可以調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速。其應(yīng)用方式及注意事項(xiàng)如下:
(1)先將盛有資料的兩個(gè)離心管及套管放天平上平衡,然后對(duì)稱(chēng)放入離心機(jī)中,若分別資料為一管,則對(duì)側(cè)離心管放入等量的其它液體。
(2)將蓋蓋好,接通電路,慢慢旋轉(zhuǎn)速度調(diào)節(jié)器到所需刻度,保持一定的速度,達(dá)到所需的時(shí)間(一般轉(zhuǎn)速2000r/min,保持15~20min),將調(diào)節(jié)器慢慢旋回“0”處,結(jié)束轉(zhuǎn)動(dòng)方可揭蓋取出離心管。
(3)離心時(shí)如有雜音或離心機(jī)震撼,立即結(jié)束應(yīng)用,進(jìn)行檢討。
(六)恒溫水浴箱
恒溫水浴箱,電熱管在箱內(nèi)夾水中間,箱前有“電源”和“加熱”唆使燈,并裝有溫度調(diào)節(jié)器,自37~100℃可以調(diào)節(jié)定溫, 水浴箱重要用于蒸餾、干燥、濃縮及溫漬化學(xué)藥品或血清學(xué)實(shí)驗(yàn)用。
使用時(shí)必需先加水于箱內(nèi),通電后電源唆使燈,再順時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)溫度調(diào)節(jié)器,使加熱指導(dǎo)燈亮即接通內(nèi)部電熱絲,使之加溫。如水溫到達(dá)所需溫度,再逆時(shí)針?lè)较蛭⑽⒄{(diào)節(jié)溫度調(diào)節(jié)器,使水溫恒定不變即達(dá)到定溫。使用時(shí),不可加水過(guò)多或過(guò)少,以浸過(guò)加熱容器為宜。使用完畢,待水冷卻后,必須放水擦干。
注意事項(xiàng):
必須強(qiáng)調(diào),在教學(xué)和生產(chǎn)中,每購(gòu)置一種新的儀器,一定要認(rèn)真瀏覽儀器闡明書(shū),以便準(zhǔn)確使用
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