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　　 HE 染色技術(shù)興起之后，通過光鏡視察，很多組織的細胞構(gòu)筑得到了充足的描寫。這些描寫有力地支撐了19 世紀(jì)中葉開端普及的細胞學(xué)說。然而奇異的是，HE 染色切片上神經(jīng)組織的細胞構(gòu)筑難以看明白，腦組織尤其如此。在鏡下能視察到顯明的藍色細胞核，以及四周的斑塊狀或顆粒狀核周質(zhì)；但核四周被著染的物資逐漸減淡并融會到四周組織中，而不是像在其它大多數(shù)組織中那樣局限在“細胞”的范疇內(nèi)。HE 染色不能有效顯示神經(jīng)組織的細胞構(gòu)造，給神經(jīng)體系的研究帶來必定艱苦，甚至使當(dāng)時的學(xué)術(shù)界對細胞學(xué)說是否實用于神經(jīng)體系發(fā)生了猜忌。

　　為了補充慣例染色技術(shù)的空缺，Nissl 染色、Weigert 髓鞘染色等辦法紛紜問世，但都沒能有效地顯示出神經(jīng)組織的細胞形態(tài)和構(gòu)筑情勢。與發(fā)現(xiàn)這些方式的學(xué)者同時期的意大利醫(yī)師Golgi 成為了榮幸者。一次偶然的機遇，他發(fā)現(xiàn)重鉻酸鉀固定的神經(jīng)組織可以被硝酸銀染成棕玄色；拿到顯微鏡下察看發(fā)明，切片上呈現(xiàn)了很多棕玄色的結(jié)構(gòu)，它們具有修長的崛起，形態(tài)各異，并似乎彼此接觸。與其它染色法的成果進行對照發(fā)明，這些具有崛起的構(gòu)造含有細胞核，可能正是構(gòu)成神經(jīng)組織的細胞。由于那個時期的認識局限，Golgi 本人仍然以為神經(jīng)組織不是由細胞組成的，而是一個通聯(lián)的原生質(zhì)網(wǎng)絡(luò)；然而他偶然發(fā)明的這一技術(shù)卻成為了開啟現(xiàn)代神經(jīng)生物學(xué)大門的鑰匙。

　　Golgi鍍銀染色的成果很快在歐洲傳布開來。19 世紀(jì)末，當(dāng)西班牙科學(xué)家Cajal看到Golgi 染色的切片后立即被其優(yōu)美的圖像所深深吸引，并在日記中留下了這樣的文字（英譯）：“What an unexpected sight! Sparse, smooth and thin black filaments or thorny, thick, triangular, stellate, or fusiform black cells could be seen

　　against a perfectly translucent yellow background! One might almost liken the images to Chinese ink drawings on transparent Japanese paper… this is the Golgi method”，讀數(shù)顯微鏡報價。從此，Cajal 以極高的熱忱開端利用Golgi 鍍銀法研討神經(jīng)組織。

　　首先，Cajal 改良了Golgi 染色法，使其更加穩(wěn)固。改良后的Golgi 染色法請求神經(jīng)組織在固定液中長時光浸泡，并用重鉻酸鉀或鋨酸進行處置；然后將組織投進低濃度硝酸銀中反映，天生棕色的鉻銀沉淀；染色后的組織用火棉膠或石蠟進行快速包埋，切成厚片，即可在顯微鏡下直接察看。這個方式已經(jīng)成為鍍銀染色的經(jīng)典技巧，今天仍在應(yīng)用。但是鉻銀沉淀為什么會恰好天生在神經(jīng)細胞上呢？為什么總是只有一小部分神經(jīng)細胞隨機著色呢？這兩個問題一直困擾著人們，至今沒有找到明白答案。

　　在經(jīng)典Golgi 染色的基本上，Cajal 又發(fā)展了后來被人冠以他自己的名字的一套染色技巧，得到了更加豐盛的圖像和主要的理論貢獻。與Golgi 染色法不同，Cajal 染色法首先借助神經(jīng)細胞的嗜銀性，用硝酸銀浸透全部組織，然后通過焦性沒食子酸、對苯二酚或甲醛將細胞內(nèi)的銀離子還原為金屬銀顆粒，即可在顯微鏡下察看到深染的神經(jīng)細胞。由于這個原理，Cajal 鍍銀染色法又叫做“還原銀法”，也是一個今天仍應(yīng)用的經(jīng)典方式。有趣的是，神經(jīng)細胞的嗜銀性似與神經(jīng)原纖維有關(guān)，由于經(jīng)過Cajal 染色后，盡管低倍鏡下看全部細胞都像充斥了棕玄色物資，但在高倍鏡下顯示的卻是精致的神經(jīng)原纖維構(gòu)造。此外，Cajal法還可以顯示切片上所有的細胞。借助這套辦法，Cajal 及其同事細心研討了成體以及胚胎時代神經(jīng)組織的細胞構(gòu)筑，提出了“神經(jīng)元學(xué)說”、神經(jīng)細胞的“極化定律”等理論；他們的結(jié)果構(gòu)成了現(xiàn)代神經(jīng)生物學(xué)的基本。1906 年，Golgi 與Cajal共同獲得了諾貝爾醫(yī)學(xué)與生理學(xué)獎。

　　在20 世紀(jì)上半葉，神經(jīng)組織的鍍銀染色法又涌現(xiàn)了一些渺小的改良。比如，基于Golgi 與Cajal 染色的原理，一些衍生技術(shù)可以用于特異性地顯示神經(jīng)組織的膠質(zhì)細胞。前蘇聯(lián)的杰尼卡染色法也以硝酸銀為反映物，可在光學(xué)顯微鏡下顯示突觸的散布。Cox 等用汞鹽取代銀鹽鍍?nèi)旧窠?jīng)細胞，同樣獲得了優(yōu)美的圖像，并且圖像的背景更清潔，染色勝利率進一步進步。Nauta 等則應(yīng)用高錳酸鉀克制正常神經(jīng)纖維著色，同樣采取鍍銀法，卻能顯示出潰變的纖維。電子顯微鏡問世后，人們發(fā)現(xiàn)鍍銀染色的成果還可在電鏡下視察。這些技術(shù)改進使科學(xué)家在神經(jīng)束路追蹤技術(shù)呈現(xiàn)之前，能夠用慣例的辦法研究神經(jīng)體系各部位的細胞形態(tài)和纖維通聯(lián)關(guān)系。因此到20 世紀(jì)50 年代呈現(xiàn)了“Golgi 法的復(fù)興”，今天威望教科書上的大部分神經(jīng)組織形態(tài)學(xué)知識就是在那個時候積聚起來的。

　　20 世紀(jì)下半葉開端，隨著神經(jīng)束路追蹤、免疫組織化學(xué)和分子生物學(xué)檢測等技術(shù)的興起，鍍銀染色這類經(jīng)典形態(tài)學(xué)技術(shù)逐漸被大多數(shù)人遺忘。然而，不論是生物醫(yī)學(xué)教學(xué)還是科學(xué)研討中，鍍銀染色技巧以其在利用范疇、圖像精致水平和標(biāo)本保留性等方面的上風(fēng)，仍然具有不可替換的位置。


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