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　　第十七章 病原微生物的檢驗項目及結(jié)果說明

　　病原微生物的檢驗重要是檢測與l臨床患者致病性有關(guān)的病原性微生物，對感染性疾病進行快速、正確地診斷，親密聯(lián)合臨床提出及時有效的治療計劃，防止微生物發(fā)生耐藥性和醫(yī)院內(nèi)感染的產(chǎn)生。

　　基本知識

　　1．什么是微生物?什么是病原微生物?

　　微生物是需借助光學顯微鏡或電-y：顯微鏡放大察看到的構(gòu)造簡略，個體渺小的生物的總稱。微生物的種類很多，醫(yī)學微生物尤其是臨床微生物重要有細菌、病毒、真菌、支原體、衣原體等。

　　微生物在自然界中普遍存在，與人類和自然界其他生物共生共存，盡大多數(shù)對人類和自然界是有益的，只有少部分可以引起人類和動植物產(chǎn)生疾病，這部分微生物才稱為病原微生物，比如結(jié)核分枝桿菌可引起結(jié)核病，痢疾桿菌可以引起痢疾等。

　　2．什么是細菌?細菌分哪幾種?

　　細菌是在自然界散布Zui廣、個體數(shù)量Zui多的有機體，是大自然物質(zhì)循環(huán)的主要參與者。其體積渺小，以微米作為丈量單位，無色半透明，只有經(jīng)過染色能力視察到細菌的輪廓及其結(jié)構(gòu)。經(jīng)革蘭染色，可將細菌分為兩大類，即革蘭陽性菌和革蘭陰性菌。細菌主要由細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、核質(zhì)體等部分構(gòu)成，有的細菌還有夾膜、鞭毛、菌毛等特別結(jié)構(gòu)。根據(jù)外形則可分為三類，即：球菌、桿菌和螺旋菌(包括弧形菌)。

　　3．什么是病毒?病毒分哪幾種?

　　病毒是構(gòu)造Zui簡略、體積Zui渺小(納米)的一類非細胞型微生物，介于性命和非性命之間的一種物資情勢，其必需嚴厲寄生在活細胞內(nèi)，含有單一種核酸即脫氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)的基因組和蛋白質(zhì)外殼，沒有細胞結(jié)構(gòu)，抗衡生素不敏感，但對于干擾素敏感。按傳布道路病毒可分為呼吸道病毒、胃腸道病毒、經(jīng)性流傳感染的病毒和狂犬病毒等。按感染部位與癥狀特點則分為肝炎病毒、出血熱病毒、皰疹病毒、侵略神經(jīng)體系的病毒和腫瘤病毒等。

　　4.什么是真菌?

　　真菌是一大類具有細胞壁和典范細胞核，不含葉綠素，不分根、莖、葉的真核細胞型微生物。細胞核高度分化，有核膜和核仁，細胞內(nèi)有完全的細胞器。

　　5. 什么是支原體和衣原體?

　　支原體為沒有細胞壁，呈高度多形態(tài)性，能通過濾器，可用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)增殖的一類Zui小的原核細胞型微生物。由于這一類微生物沒有細胞壁，能形成絲狀與分支外形而稱其為支原體。衣原體是一類專性細胞內(nèi)寄生、有奇特發(fā)育周期、能通細致菌濾器的原核細胞型微生物，多呈球狀、堆狀，有細胞壁。

　　6. 人體內(nèi)的正常茵群是指什么?

　　在人的皮膚表面體表、口腔、鼻咽、腸道等腔道黏膜中都存在著細菌，對人體無害甚至有益的細菌稱為正常菌群，比如腸道菌群可以將不能接收的食品殘渣進行分解成為糞便排出體外，還可以制作維生索等對人體都有益處。

　　7.細菌檢測和病毒檢測，真菌檢測各有哪些辦法?

　　細菌可通細致菌形態(tài)構(gòu)造、培養(yǎng)特征、生化反映、血清學實驗等方式進行檢測。

　　病毒的檢測包括電子顯微鏡察看、抗原檢測、核酸檢測、病毒分別培養(yǎng)及抗體檢測等道路。

　　真菌檢測采取直接涂片法、培養(yǎng)法、免疫學實驗及動物試驗等方式。

　　8. 支原體和衣原體檢測有哪些方法?

　　衣原體檢測可采取酶免法、直接免疫熒光法，核酸檢測技巧包含DNA探針法、聚合酶鏈式反映(PCR)、銜接酶鏈式反響(LCR)等和細胞培養(yǎng)法等。支原體試驗室檢測辦法有：形態(tài)學檢查、支原體培養(yǎng)、抗原檢測、血清學方法和分子生物學方式。

　　9．用于檢測病原微生物的標本有哪些?

　　依據(jù)病人的癥狀，醫(yī)生的初步斟酌屬于某個部位感染就留取此部位的樣本進行細菌檢查，常用于微生物檢查的標本有血液、大便、痰、尿、腦脊液、胸水、腹水、關(guān)節(jié)液、各種拭子、各種分泌物、各種排泄物、各種穿刺液等。

　　檢驗項目及正常參考值

　　1．血液

　　(1)涂片查瘧原蟲、利杜體：未見瘧原蟲、利杜體。

　　(2)血培育：無細菌生長。

　　2．痰

　　(1)涂片革蘭染色：未見真菌及革蘭陰性桿菌。

　　(2)涂片抗酸染色(找結(jié)核菌)：未見抗酸桿菌(結(jié)核桿菌)。

　　(3)痰培養(yǎng)：無致病菌生長。

　　3．尿

　　(1)中段尿培養(yǎng)：無細菌生長。

　　(2)24小時尿沉渣找結(jié)核菌：未見抗酸桿菌(結(jié)核桿菌)。

　　4．大便

　　(1)大便培養(yǎng)：無致病菌生長；無志賀菌和沙門菌生長。

　　(2)大便球桿菌比例：l:3～1:5。

　　5．腦脊液、胸腹水、關(guān)節(jié)液

　　(1)涂片革蘭染色：未見細菌。

　　(2)涂片抗酸染色：未見抗酸桿菌。

　　(3)腦脊液墨汁染色；未見新型隱球菌。

　　(4)腦脊液、胸腹水、關(guān)節(jié)液培養(yǎng)：無細菌生長。

　　專家解讀

　　1. 為什么要做微生物檢討7

　　依據(jù)不同的病情采集不同的標本進行涂片或培養(yǎng)的檢測，從而得出是何種致病菌，并迸一步做藥敏實驗，從而得出哪些藥物對此菌敏感，哪些藥物耐藥，進而依照藥物敏感性進行有針對性的應用抗生素，避免盲目用藥造成的經(jīng)濟上的喪失以及耽擱病情所造成的嚴重成果。所以，只要發(fā)熱猜忌有感染都應當進行細菌培養(yǎng)、涂片查細菌等有關(guān)微生物方面的檢驗。

　　2．什么標本要留于指定的容器中?

　　要找到患者的真正的致病菌，就要先消除外界環(huán)境中的微生物污染，醫(yī)院指定的容器是經(jīng)過高壓滅菌的，是無菌的容器，將標本留于其中，得到的結(jié)果才是正確的結(jié)果。

　　3．為什么標本留取時有合格與不及格之分?

　　對于醫(yī)學微生物學來說，檢測的目標是找出真正的致病菌，對癥用藥，以使患者得到及時的治療。因此標本留取是否及格直接影響著報告結(jié)果，所以要準確留取。

　　4．怎樣準確留取痰液?

　　留取痰液時應該是留取凌晨第一口痰，留痰前用凈水漱口或刷牙，有義齒(假牙)者取下后漱口或刷牙，咳出深部痰，以黏性、膿性或血性為佳，白色泡沫痰一般為涎液，應棄之重新留取，痰液吐人專用無菌容器中。

　　5．什么叫中段尿培養(yǎng)?

　　中段尿培養(yǎng)是診斷尿路感染的主要根據(jù)，也是治療時使用何種抗生索的根據(jù)，非常主要。但是在臨床工作中，不少病人對如何留取中段尿的方法懂得不夠，尿液被污染，培養(yǎng)結(jié)果出現(xiàn)假陽性。正確的留取方法是：先將外陰部洗清潔，用合適的消毒液消毒后再排尿，將剛開端的尿不要，到大約排出尿液l/3后，再用消毒的無菌的管子接尿，留取2～5ml即可，蓋蓋送檢，注意不要用手摸

　　蓋子與尿管內(nèi)壁接觸的部分，以確保尿液不被污染。

　　6．怎樣留取糞便標本?

　　糞便培養(yǎng)必須留取有膿血或有黏液的部分，如果取的部位不當就培養(yǎng)不出致病菌。留取的大便必需放在指定消過毒的容器中，若是放在普通的未消毒的容器中，會被容器中的細菌污染，培養(yǎng)出的細菌不是真實的致病菌。有的將留取的大便標本放在普通紙盒內(nèi)甚至放在紙上，都是不正確的。

　　7．為什么化膿性感染病灶中取膿汁培養(yǎng)陽性率反而較低？

　　膿液是由壞逝世的組織和吞噬了細菌而逝世亡的白細胞組成，都是無任何養(yǎng)分的物資，而細菌一般都須要在有較高養(yǎng)分的環(huán)境中才干生存生長，因此，在膿液中幾乎沒有細菌，所以取膿液培養(yǎng)也就難以培養(yǎng)出陽性結(jié)果。

　　8．為什么培養(yǎng)的結(jié)果要3天甚至更久才干出結(jié)果?

　　微生物培養(yǎng)不是一時一會兒就可以完成的，它有其自身的生長周期。當標本送檢后應及時接種到相應的培養(yǎng)基上，然后放置于溫度、濕度恒定的孵箱中，孵育24～48小時后取出， 察看生長的細菌外形，并進行一些生化反響，從而鑒定出細菌名稱。在這些生化反映中，有些是可以在幾分鐘之內(nèi)看到結(jié)果，而大多數(shù)反響是要在24小時后才干得到結(jié)果。同時要對致病菌進行藥敏試驗，依然是要24小時出結(jié)果。因此終極的報告是要到第3天甚至是更久能力簽發(fā)。 9. 為什么痰既要做涂片又要做培養(yǎng)?

　　由于培養(yǎng)的進程須要消耗的時光較長，為了幫助臨床做出快速的診斷，并公道的選用抗生素，可以先進行涂片，得到大體的細菌分類，如革蘭陽性菌或者革蘭陰性菌。依據(jù)此大致的結(jié)果，再聯(lián)合臨床的癥狀及其他檢查，選用適合的藥物。

　　10. 痰涂片可隊取代痰培養(yǎng)嗎?

　　痰涂片只是一個大致的分類結(jié)果，并不能鑒定出是何種致病菌，更無法得到此菌對哪類的藥物敏感，因此為了得到準確的結(jié)果，就要進行培養(yǎng)，從而得到鑒定和藥敏的結(jié)果。

　　11. 尿培養(yǎng)為什么呈現(xiàn)污染就要重新留取尿標本?

　　假如患者是尿路感染的話，其致病菌應當是單一的，不會超過兩種，所以當培養(yǎng)的結(jié)果涌現(xiàn)三種甚至更多的時候，應斟酌是否是標本污染，為了結(jié)果的精確性，建議患者重新留取標本送檢以排除外界污染的影響。

　　12. 血培養(yǎng)的培養(yǎng)時問為什么比痰培養(yǎng)的時問長?

　　血培養(yǎng)的時光一般為7～10天。正凡人的血液中是沒有細菌生長。當某些細菌進血后，其數(shù)目比擬少，為了對其進行鑒定并得到藥敏結(jié)果就要先對其進行增殖，即讓其在合適的環(huán)境下滋生，當增殖到必定數(shù)目落后行進一步的鑒定和藥敏試驗。

　　13. 為什么尿培養(yǎng)要進行菌落計數(shù)?

　　尿路感染通常是指細菌性感染，故尿液細菌數(shù)目成為其診斷的根據(jù)，而單純根據(jù)患者的臨床癥狀及體征難以確診，因此尿培養(yǎng)對尿路感染的診斷及治療很有意義。根據(jù)尿菌落計數(shù)的多少來差別是標本污染還是尿路感染。一般每毫升在1萬個以下多為污染；10萬個以上為真性細菌尿，可確定為感染；l萬～10萬個為可疑，應反復培養(yǎng)。

　　14. 糞便中重要致病菌包括哪些?

　?、偕抽T菌屬可導致傷冷?。虎谥举R菌屬可導致痢疾?。虎鄞竽c桿菌O157菌可導致出血性腸炎；④霍亂弧菌可導致霍亂??；⑤金黃色葡萄球菌可導致化膿性腸炎；⑥變形桿菌等可導致急性腸炎；⑦白色念珠菌等可反應出抗生素使用過量，應盡快結(jié)束應用抗生素。

　　15. 糞便的球桿菌比指什么?

　　球桿菌比是用于視察腸道菌群是否失調(diào)的指標，是針對長期大量利用廣譜抗生素患者監(jiān)測腸道菌群變更，防止二重感染的必要手腕。所謂球桿菌比就是糞便中球菌與桿菌數(shù)量的比值。正常時以桿菌為主。

　　16. 分泌物、膿液等如何留取標本?

　　此類標本假如直接留取會將皮膚表面的細菌一起采樣，從而導致培養(yǎng)的結(jié)果不能精確反應出真正的致病菌。因此，在采樣時應先進行局部消毒清洗，然后從深部采樣，以得到真正的致病菌。采樣進程可以由醫(yī)護職員完成。

　　防患未然

　　1. 如何根據(jù)培養(yǎng)結(jié)果辨認標本被污染?

　　當看到一份陽性的細菌報告時，應將培養(yǎng)結(jié)果與培養(yǎng)的標原形結(jié)合斟酌，由于特定的標本有特定的致病菌，比如痰培養(yǎng)的致病菌就不會是甲型鏈球菌和奈瑟菌，但在尿標本中培養(yǎng)出甲型鏈球菌就可能是致病菌。同時不能僅以一次的培養(yǎng)結(jié)果就作出斷定，應多次送檢。當多次培養(yǎng)的結(jié)果一致時，就可判定此菌是致病菌而非是污染而來。

　　2. 化膿性感染灶培養(yǎng)標本的準確留取方法是什么?

　　化膿性病灶一般位于皮膚表面，破潰出膿，要留取細菌培養(yǎng)標本千萬不可馬虎大意，取點膿液就送檢。精確的取樣辦法是，將膿液擠清潔后在肉芽生優(yōu)點取標本送培養(yǎng)，由于肉芽生優(yōu)點養(yǎng)分豐盛，細菌較多，輕易培養(yǎng)出陽性結(jié)果。假如化膿性病灶尚未破潰，可以采取注射器穿刺到必定深度，顯微鏡報價攝像頭報價，估量在肉芽鄰近的處所抽取標本送檢，培養(yǎng)結(jié)果會比淺處取出的標本后果好。

　　3. 為什么要重復采血進行血培養(yǎng)?

　　血培養(yǎng)的標本應在病人發(fā)熱初期或根據(jù)不同的發(fā)熱情形在未用抗生素前采集做細菌培養(yǎng)。只有在高熱的時候，細菌才會開釋在外周血中，同時由于其含量極少，所認為了進步陽性率需持續(xù)采血進行培養(yǎng)。

　　4. 如何防止尿路感染?

　　腎臟排泄的尿液，對膀胱和尿道起著沖刷作用，有利于細菌的排出，天天大量飲水，2～3小時排尿l次，能避免細菌在尿路的滋生，可下降尿路感染的發(fā)病率，這是預防尿路感染Zui適用有效的方法。要經(jīng)常注意陰部的干凈，要勤洗澡，且不要用池浴或盆浴，要勤換內(nèi)褲，在新婚、月經(jīng)、妊娠和產(chǎn)褥期，尤應注意。女嬰要勤換尿布。

　　5. 怎樣防止呼吸道的細菌感染?

　　注意均衡飲食，進行活動，有足夠休息，減輕壓力和避免吸煙，以加強身材的抵御力，同時堅持良好的個人衛(wèi)生習慣，堅持室內(nèi)空氣流通。如有呼吸道沾染病癥，應盡早找醫(yī)生診治，愈早醫(yī)治，痊愈機遇愈高。

　　6. 如何預防細菌性痢疾?

　　注意個人衛(wèi)生，喝開水不喝生水，用消毒過的水洗瓜果蔬菜和碗筷及漱口；飯前便后要洗手，不要隨地大便；吃熟食少吃涼拌菜，剩飯剩菜要加熱后吃；做到生熟離開，防止蒼蠅叮爬食品；得病后要及時就醫(yī)治療。

　　走出誤區(qū)

　　1. 痰涂片未找到結(jié)核桿菌就能消除肺結(jié)核了嗎?

　　痰涂片未找到結(jié)核桿菌不能排除肺結(jié)核。由于結(jié)核桿菌不是隨時都能隨痰排出的，應采集患者在凌晨漱口，深咳留取的第一口痰，并且要持續(xù)3天送檢以進步檢出率。

　　2. 痰培養(yǎng)結(jié)果正常是沒有培養(yǎng)出細菌嗎?

　　痰是從呼吸道經(jīng)口腔排出的，正凡人的口腔中也含有大批的正常菌群，主

　　要包括甲型鏈球菌和干燥奈瑟菌，這些菌對人體是不會致病的。因此，痰培養(yǎng)

　　的正常結(jié)果可以包含此兩種菌。

　　3. 當痰培養(yǎng)沒有培養(yǎng)出致病菌就可隊判斷沒有細菌感染嗎?

　　從患者的標本留取到標本的運輸和接種，各個環(huán)節(jié)都會直接影響培養(yǎng)的結(jié)果。首先患者留取的痰標實質(zhì)量，直接決議成果的正確性。當標本不及格時，即便有致病菌也可能造就不出來，從而耽擱診斷和治療。留取痰液時應當是留取凌晨第一口痰，留痰前用凈水漱口或刷牙，有義齒者取下后漱口或刷牙，咳出深部痰，以黏性、膿性或血性為佳，白色泡沫痰一般為涎液，應棄之重新留取，痰液吐進專用無菌容器中。標本留完后，應立即送檢，防止標本干枯。因此，為了進步致病菌的檢出率，應適量增添送檢次數(shù)。

　　4. 尿培養(yǎng)陰性可隊判斷沒有尿路感染嗎?

　　尿造就陰性對消除尿路沾染有必定價值。但是有時會涌現(xiàn)假陰性，包含以下幾種可能：①外陰消毒對尿造就影響很大，消毒液過多而混進尿標本，克制了細菌生長，呈現(xiàn)假陰性成果；②尿培養(yǎng)前曾應用抗菌藥物，可呈現(xiàn)假陰性；③膀胱內(nèi)尿液停留時光短(不到6小時)，或飲水太多，稀釋了尿中細菌，可有假陰性；④血源性急性腎盂腎炎、腎本質(zhì)內(nèi)小膿腫形成，慢性腎盂腎炎黏膜病變趨向痊愈，而腎本質(zhì)病變依然存在，或尿路阻塞并存感染灶與尿路不相通，則尿中細菌往往呈陰性；⑤尿路沾染的排菌可呈間歇性，如慢性腎盂腎炎沒有急性癥狀時，尿培育可為陰性，但在其急性發(fā)作時，尿培育則常為陽性。由此可知，對尿細菌學檢討成果的斷定，必需聯(lián)合臨床表示及其他檢討，有時還要重復多次進行。

　　5. 尿培養(yǎng)陽性結(jié)果就是尿路感染嗎?

　　尿培養(yǎng)出現(xiàn)假陽性有可能是尿液收集不新穎，放置時間超過l小時，導致細菌大批滋生，從而出現(xiàn)假陽性。因此應及時留取標本送檢。

　　6. 糞便中有細菌就是細菌性痢疾嗎?

　　糞便是人體消化體系自口腔中攝入食物，經(jīng)過胃、腸一系列消化接收后，排出體外的食品殘渣。它的形態(tài)、色彩、成分可直接反應出人體全部消化體系(包括胃、十二指腸、肝、膽，空腸、回腸)的功效是否健全、有無異?；蚓植扛腥静≡畹取Ｕ４蟊阒袘写笈募毦?，主要是大腸桿菌，它是腸道的主要寄生菌，同時它形成了一個正常菌群，其作用主要是：①保護腸道的消化接收功效；②抵抗外侵細菌。細菌性痢疾是由志賀菌屬引起，因此，題中的說法是不準確的。

　　7. 痢疾病人大便的細菌可以直接涂片看痢疾桿菌嗎?

　　痢疾是由志賀菌引起的，由于糞便本身就有細菌，因此，直接涂片是無法看到志賀菌的，只有經(jīng)過培養(yǎng)，進而能力鑒定其種別。

　　8. 藥物敏感試驗表現(xiàn)敏感的藥物殺菌后果就確定好嗎?

　　藥物敏感試驗都是將病原微生物從患者身上分別出來。然后體外培養(yǎng)，得到純體后再進行鑒定和藥敏試驗，由于體外和體內(nèi)的環(huán)境不同，有的細菌可以應用體內(nèi)的一些物資天生抵御抗生素的成分，使抗生素失效。所以會出現(xiàn)體外敏感，而體內(nèi)耐藥的情形。同時在體內(nèi)用藥的劑量與藥敏試驗的實際劑量的差別也會導致藥物敏感性與臨床后果涌現(xiàn)偏差。

　　


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